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El protocolo de una prueba PCR de las que ya se hacen en Zamora, así se hace una PCR en el laboratorio del HVC Destacado

El protocolo de una prueba PCR de las que ya se hacen en Zamora, así se hace una PCR en el laboratorio del HVC

Tras la extración de sangre del paciente con síntomas o en otros casos asintomáticos y que hayan tenido contacto con positivos o estén ahora mismo en el punto de mira de los rastreadores, se aconseja la realización de la prueba PCR. Una prueba que realmente se puede practicar en el laboratorio en este caso del HVC en Zamora o en cualquier laboratorio de hospital.

Las PCR (siglas en inglés de "Reacción en Cadena de la Polimersa"), son un tipo de pruebas de diagnóstico que se llevan utilizando durante años en diferentes crisis de salud pública y que están relacionadas con enfermedades infecciosas. Estas pruebas se están usando desde los primeros días del estallido de la pandemia de coronavirus en España.

También los test rápidos se han incorporado recientemente y, como su nombre indica, son más rápidos y sencillos. Ambos sirven para comprobar si una persona está infectada o no por el Covid-19. Estos permiten conocer en 10 o 15 minutos si una persona está o no infectada. Por su parte, las PCR pueden llegar a tardar varias horas.

Este es el protocolo de como realizar una PCR:

Inicialmente se le hará la prueba de detección de la COVID a aquellas personas que sufren algún tipo de síntoma o que por causas diferentes debe ser ingresado en el hospital. Por supuesto hay pacientes a los que se le deben dar prioridad a la hora de realizar las pruebas. Esta prioridad se les dará a aquellas personas que se encuentren más graves, deben entrar en quirófano, paritorio etc... Dicha prioridad la determinara el facultativo encargado del área de COVID tras estudiar los antecedentes y el cuadro clínico de cada paciente.

En todo caso la prueba que se emplea para la determinación es una PCR. Esta técnica se basa en la amplificación de moléculas de ARN con el objetivo de poder ser detectada. Hay varias formar para realizar la PCR:

1.GENEXPERT :
Es la técnica en la que el resultado se obtiene en 45 minutos. La sensibilidad de este aparato es superior a una PCR tradicional. Este método se empleará con muestras urgentes y muestras dudosas para poder dar una respuesta lo más fiable posible.

MODO DE USO

Se necesita:
Una muestra nasofaríngea en liquido de enriquecimiento
Kit GeneXpert que está compuesto por un cartucho listo para su uso y una pipeta que absorbe la cantidad justa para que la prueba se realice correctamente.

2.PCR TRDICIONAL:
El resultado se obtiene en 3 horas aproximadamente.
Esta técnica consta de varios pasos:

o INACTIVACINO DEL VIRUS: se trata de exponer la muestra durante 20 min a 60 grados centígrados.

o RUPTURA CELULAR: A cada muestra se le dispensara una enzima PROTEINASA empleada para que el material genético salga a la matriz y poder ser identificado posteriormente.

o EXTRACCION ELUIDO: esta parte dura 45 minutos. En esta etapa se obtiene un concentrado del material genético.

oTERMOCICLADOR: Este es el último paso de la técnica. Esta etapa dura 1 hora y 20 minutos. Consta de varios ciclos, con variaciones de temperatura con el objetivo de crear copias idénticas del material genético. La detección se realiza a través de la retrascripción y posterior amplificación a tiempo real de la secuencia diana, produciéndose ambas reacciones en el mismo recipiente.

Explicación de las reacciones: Tras la amplificacion del ARN, se sintetiza el ADN complementario a la secuencia diana y esto tiene lugar gracias a otra enzima, la trascriptasa inversa. La identificación del COVID se leva a cabo mediante una reacción en cadena de la polimerasa (enzima), para que esto se realice de forma optima debe haber presente en la reacción oligonucleótidos específicos y una sonda marcada con florescencia que hibridan con una región diana conservada de los genes ORFI1ab y N.

3.SEROLOGIA A PARTIR DE PLASMA:
Es el método más rápido pero el menos fiable de todos los anteriormente mencionados. El resultado se obtiene en 20 minutos pero no se trata de una PCR sino de una determinación de la presencia o ausencia de inmunoglobulinas.

MODO DE USO
Se necesitará:
- Muestra sanguínea que será centrifugada al llegar al laboratorio. Para la detección se empleará el plasma sanguíneo aunque también se podría realizar con sangre total siendo este último aún menos fiable.
-Kit serología que consta de dos placas con tiras de reacción y un buffer con los reactivos necesarios.
Con este método se determinan la inmunoglobulina M y G presentes en la sangre. Siendo la IgM la molécula que afirmaría la presencia del virus en el cuerpo y la IgG que afirma haber creado inmunidad frete al virus.

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